公共衛(wèi)生學(xué)院徐婕講師報(bào)道BATF缺失可提高CAR-T細(xì)胞抗腫瘤活性

中國(guó)是全球結(jié)直腸癌每年新發(fā)病例最多的國(guó)家,，我國(guó)結(jié)直腸癌的發(fā)病率和死亡率逐年上升,，已成為嚴(yán)重威脅人群健康的重要公共衛(wèi)生問(wèn)題。結(jié)直腸癌惡性程度高，現(xiàn)有療法療效并不理想,，即使是針對(duì)早期患者的手術(shù)切除,，復(fù)發(fā)率也高達(dá)40 %,，針對(duì)晚期患者的放/化療又容易產(chǎn)生耐藥性,。據(jù)統(tǒng)計(jì)，結(jié)直腸癌早期患者的五年生存率約90 %,，但晚期患者的五年生存率不足15 %,，因此，尋找結(jié)直腸癌的新型治療方法具有重要的科學(xué)意義,。近年來(lái),，免疫療法在腫瘤治療學(xué)領(lǐng)域的發(fā)展突飛猛進(jìn)，已成為多種惡性腫瘤的潛在治療方法,，這為結(jié)直腸癌的治療打開(kāi)了新思路,。其中，嵌合修飾的T細(xì)胞（Chimeric Antigen Receptor Engineered T cells,，CAR-T）療法在血液腫瘤治療中表現(xiàn)驚艷,，成為領(lǐng)域內(nèi)唯一被FDA批準(zhǔn)上市的細(xì)胞產(chǎn)品。隨后,，越來(lái)越多的CAR-T療法向?qū)嶓w瘤發(fā)起沖擊,，希望在實(shí)體瘤的治療上做出突出貢獻(xiàn)。靶向HER2的CAR-T療法已被用于治療乳腺癌,、卵巢癌,、胃癌、肺癌等,，并取得顯著療效,，近期研究發(fā)現(xiàn)HER2在結(jié)直腸癌中的表達(dá)水平同樣顯著升高，是結(jié)直腸癌的潛在治療靶點(diǎn),，但HER2 CAR-T靶向治療結(jié)直腸癌的特異性與有效性尚缺乏系統(tǒng)的研究,。

2021年11月27日，昆明醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院徐婕講師與首都醫(yī)科大學(xué)陳瑞教授課題組合作,，在Cell Death Disease上發(fā)表題為HER2-specific chimeric antigen receptor-T cells for targeted therapy of metastatic colorectal cancer的最新研究成果,。首先，為了證實(shí)HER2是結(jié)直腸癌,、尤其是轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌的潛在治療靶點(diǎn),，該研究利用HER2特異性抗體、通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)在7種常用結(jié)直腸癌細(xì)胞株、86對(duì)結(jié)直腸癌患者新鮮組織樣本中檢測(cè)HER2的表達(dá)水平,，并利用免疫組織化學(xué)染色技術(shù)在擴(kuò)大樣本的1040例結(jié)直腸癌患者組織芯片中驗(yàn)證HER2的表達(dá)水平,，結(jié)果顯示：HER2在轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌患者組織中的表達(dá)水平顯著升高，HER2的表達(dá)水平與患者預(yù)后相關(guān),，證實(shí)HER2是轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌的潛在治療靶點(diǎn),。

通過(guò)與愛(ài)康得生物科技(蘇州)有限公司合作，利用第二代CAR技術(shù)自主構(gòu)建人源性,、特異性HER2-CAR,，通過(guò)病毒感染技術(shù)感染對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的T細(xì)胞,，以構(gòu)建特異性的HER2 CAR-T細(xì)胞,。將HER2 CAR-T細(xì)胞與結(jié)直腸癌細(xì)胞進(jìn)行不同比例的共培養(yǎng)（E：T = 1：1，5：5,，10：1）,，利用乳酸脫氫酶（Lactate dehydrogenase，LDH）檢測(cè)試劑盒,、在酶標(biāo)儀上檢測(cè)HER2 CAR-T細(xì)胞對(duì)癌細(xì)胞的特異性裂解作用,；利用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定共培養(yǎng)前后細(xì)胞因子IL-2的分泌；利用Annexin V-FITC/PI雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒,、通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)HER2 CAR-T對(duì)癌細(xì)胞凋亡的影響,，并對(duì)數(shù)據(jù)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析；此外,，對(duì)對(duì)照組T細(xì)胞和HER2 CAR-T細(xì)胞在病毒感染7天后進(jìn)行凋亡水平和耗竭因子表達(dá)水平檢測(cè),，在病毒感染14天后進(jìn)行染色體核型分析，評(píng)估HER2 CAR-T細(xì)胞治療結(jié)直腸癌的安全性,。結(jié)果顯示：HER2 CAR-T在體外表現(xiàn)出特異性的殺傷作用及良好的安全性,。

在此基礎(chǔ)上，建立三種不同類(lèi)型的結(jié)直腸癌異種移植動(dòng)物模型,，深入探索HER2 CAR-T對(duì)結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展的影響,。結(jié)果顯示：無(wú)論是通過(guò)腋下注射的方式構(gòu)建結(jié)直腸癌異種移植小鼠模型、利用新近確診的結(jié)直腸癌患者新鮮腫瘤組織樣本構(gòu)建PDX小鼠模型,，還是利用尾靜脈注射構(gòu)建的結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移模型,，HER2 CAR-T細(xì)胞均表現(xiàn)出顯著的抗腫瘤療效及安全性。

綜上所述,，該研究鑒于以往的經(jīng)驗(yàn)和未來(lái)的可能性,，大膽探索將CAR-T療法引入實(shí)體瘤治療。該研究是第一個(gè)通過(guò)一系列嚴(yán)格的體內(nèi)/外實(shí)驗(yàn)證實(shí)HER2 CAR-T是轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌的一種新興的免疫治療方法,，為此類(lèi)患者的康復(fù)提供了一種新的治療策略,。

昆明醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院徐婕講師為論文第一作者，首都醫(yī)科大學(xué)陳瑞教授為本文的通訊作者。

圖1HER2 CAR-T細(xì)胞療法用于治療結(jié)直腸癌的三種動(dòng)物模型

 論文鏈接：https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34839348/